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论文范文小鼠髌腱干细胞分化过程中的力学特性

论文类型:论文范文
论文字数:
论点:细胞,牵引力,干细胞
论文概述:

细胞作用于细胞外基质的力称为细胞牵引力(Cell Traction Force)。它由肌动球蛋白的相互作用和肌动蛋白的聚合作用而产生

论文正文:

[摘要]细胞作用于细胞外基质的力称为细胞牵引力。它是由肌动蛋白和肌动蛋白聚合的相互作用产生的。研究发现,细胞牵引受α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的调节。细胞牵引具有促进细胞运动、感知细胞外基质环境、维持细胞形状、产生传导信号、维持细胞生理特性等功能。细胞牵引是细胞的一个重要物理参数,与细胞的许多生物学过程密切相关,如炎症反应、伤口修复、血管生成、信号转导等。研究细胞牵引力可以使人们更全面地了解细胞及其生长发育机制。本实验通过测量小鼠髌腱组织干细胞分化前后细胞牵引力的变化,研究干细胞分化过程中细胞牵引力的变化规律。目的:通过测量小鼠髌腱组织干细胞分化前后不同形态的细胞牵引力,探索小鼠髌腱干细胞在整个分化过程中细胞牵引力的变化规律,进一步了解细胞生长发育的变化规律,进一步了解细胞的生物学特性。方法与结论:细胞培养。获得小鼠髌腱干细胞,并在CO2培养箱中培养。培养三到四天后,不粘附在壁上的细胞被去除。用倒置显微镜观察细胞的生长状态。选择克隆干细胞进行扩大培养,每三天传代一次。当大多数细胞具有良好的菌落形态时,采用CTFM(细胞牵引力微拷贝)法测量细胞牵引力。CTFM是一种通过显微镜跟踪测量细胞牵引力的技术。其基本原理是根据细胞基体的弹性表面变形来测量细胞牵引力的技术。根据不同的细胞大小,制备不同硬度的弹性基底,并在弹性基底的制备中混合荧光微珠,以确定基底的变形程度。当测量细胞牵引力时,细胞被移植到弹性基质的表面。当细胞附着时,基质会变形。此时,用荧光显微镜的普通光源拍摄附着在基质上的细胞的细胞照片,然后用荧光光源拍摄基质照片,用1M氢氧化钠杀死细胞,使细胞与基质表面分离。此时,弹性矩阵将返回其原始位置,然后拍摄返回其原始位置的矩阵图片。细胞牵引力可通过用MATLAB7.0专用自编程序比较分析细胞分离前后基质形态的变化图来计算。应用蛋白质印迹技术检测小鼠髌腱干细胞分化前后α-形状记忆合金的表达。小鼠髌腱干细胞分化后,当形态发生明显变化形成成纤维细胞时,细胞牵引力将显著降低,平均降低约30%。同时,α-形状记忆合金的含量也发生了相应的变化。小鼠髌腱干细胞分化后细胞牵引力下降,表明分化过程中干细胞的分子结构和组成发生了显著变化,尤其是α-形状记忆合金的含量。这表明在分化过程中,随着分化过程的进行,α-SMA的基因表达受到一定程度的限制。用于蛋白质检测的荧光抗体技术。间接荧光染色结果表明,小鼠髌腱干细胞分化前后蛋白质含量发生明显变化。小鼠髌腱干细胞分化后的蛋白质含量较分化前明显降低,蛋白质含量的降低表明干细胞的细胞牵引力降低。更多恢复

【摘要】细胞通过肌动球蛋白相互作用和肌动蛋白聚合产生内部张力,对细胞外基质施加牵引力。这种内部张力被称为细胞牵引力(CTF)。CTF受细胞内蛋白质如α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子-β(TGF-β)的调节,它是一个重要的物理参数,对许多生物过程至关重要,包括转移、炎症、伤口愈合、血管生成、细胞形状维持和机械信号产生。对细胞牵引力的研究使我们能够更好地理解这些细胞及其生长机制。在本研究中,研究者希望通过测量髌腱干细胞分化前后的CTF值来寻找其分化机制。目的:通过测量髌腱干细胞分化前后的CTF值,探讨其分化机制。为生理学和病理学提供了新的启发和理论。方法和结论:培养细胞。获取所需细胞,并在CO2培养箱中培养。三到四天后,取出未锚固的细胞。用倒置显微镜观察细胞,每三天采集克隆细胞的生长,直到大多数细胞状态良好。CTFM(细胞牵引力显微镜)方法,在测量CTF时使用弹性PAG基底,在制造PAG时使用荧光珠。位移场可以根据细胞表面标记的运动来确定,我们可以得到一对“受力”和“零力”的显微图像,即细胞附着在基底上和脱离时的图像。蛋白质印迹法测定髌腱干细胞分化前后的α-形状记忆合金。结果:小鼠髌腱干细胞分化后,形态发生明显变化,CTF明显下降。CTF的平均震级降低了30%。(α-形状记忆合金)的量也相应减少。这表明髌腱干细胞的结构和组成发生了显著变化,并在一定程度上改变了基因的表达。用荧光抗体技术检测蛋白质。利用间接荧光染色显示蛋白质:小鼠髌腱前后干细胞内部蛋白质含量发生了明显变化。小鼠髌腱干细胞在相对蛋白质第一次分化后,我不确定我是否能够做到这一点。

[关键词]髌腱;细胞牵引;变化;CTFM;【关键词】[/br/】髌腱;CTF;变异;CTFM;

小鼠髌腱干细胞分化过程中力学性质的研究
[目录]摘要5-7
摘要7-8
1引言11-21
1.1细胞牵引(CTF) 11
1.2干细胞11-13
1.2.1干细胞的引入11-12
1.2.2干细胞研究的意义12-13
1.3α-光滑 1.6本研究课题的目的和意义15-16
1.7国内外研究进展16-19 [/ Br/] 1.8理论假设19
1.9研究目标19-21
2实验设计21-23
2.1 ctfm方法21-23
3材料和方法23-37
3.1主要材料和仪器23-25
3.2.1实验25-28之前的准备[/溴/] 3.2.2细胞分离和培养28-30[/溴/] 3.2.3基质制备30-31[/溴/] 3.2.4细胞移植31-32[/溴/] 3.2.5图像拍摄32-34[/溴/] 3.2.6图像信息的分析和处理34[/溴/] 3.3蛋白质印迹技术以检测α-SMA 34[/溴的表达 4.1 CTFM方法测量小鼠髌腱干细胞分化前后的细胞牵引力37-41
4.2小鼠髌腱干细胞分化前后α-形状记忆合金含量的表达41-42
4.3小鼠髌腱干细胞分化前后蛋白质含量的表达42-45 [/BR/] 5讨论45-47 [/BR/]参考47-55 [/BR/]研究结果55-57 [/BR/]确认57 小鼠干细胞分化过程中牵引力变化的研究[。沈阳大学2011
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